广州single cell RNA单细胞测序服务

Single Cell Sequencing技术，即利用优化后的高通量测序技术（NGS，Next Generation Sequencing）分析每一个单个细胞的序列信息，从而更高分辨率地揭示细胞间的细胞差异以及其在微环境中的功能情况。那么问题来了，如何获得单个细胞？如果无法获得单个细胞这一切都是不成立的；如何获得大批量的单个细胞？单个组织细胞群体通常在百万级别以上，如果被检测的测序细胞数量过小精确度不足；如何低成本地获得大批量单个细胞？单细胞测序成本非常高，尤其是需要测2000~3000个以上的细胞的时候，如果单个细胞的分选成本也很高，技术根本无法普及。所以，正因为这些问题的存在使得高通量测序在单个细胞测序应用中的普及度一直不足，直到几个单细胞测序突破性技术的诞生。单细胞测序是高通量测序下的又一重大技术突破。广州single cell RNA单细胞测序服务

单细胞测序结果动辄上百G数据量，庞大的数据对于分析平台和分析能力有着很高的要求，首先针对下机数据的质控环节：单细胞测序产生数亿的结果序列，不可避免的会出现低质量的测序结果，存在各种情况的序列污染。因此序列过滤及质量评估就会变得极为重要。序列质量主要通过测序质量值Q20/Q30的占比来表征，即碱基测序结果的错误率在1% / 0.1%以下的比例。理想的测序结果reads的碱基质量均高于30。保证数据获得后的处理结果的准确性，为后续细胞类型鉴定和功能分析打下坚实基础。广州single cell RNA单细胞测序服务单细胞多组学测序可识别重要的转录因子，进行谱系和发育追踪。

基于测序的数据能够将彰显其强大之处，因为它能够了解同一单细胞的多种生物分析指标。如果说单细胞基因表达提供了一种颜色的详细信息，那么单细胞多组学提供了同一细节的全彩色图谱，为您带来样本的真实视图。烈冰自2019年引进的BD Rhapsody单细胞平台以来，能够从同一单细胞中读取细胞复杂性的多组学特征。与传统方法不同，单细胞多组学简化了您需要开展的实验，也节省了您需要分析的样本，而能获得相同的结果。这不但节省了宝贵的样本，还保证了更高的生物学准确性，因为您不需要匹配拆分样本的数据集并通过计算来推断各个组学之间的关系。

针对单细胞测序的细胞上样数，为什么不建议捕获到的细胞数量越高越好？一味地追求高数量的细胞捕获可能会存在一些问题。例如在上机细胞悬液浓度固定时，如果目标细胞捕获数增加到8000甚至10000，上样细胞悬液体积势必增加，在细胞悬液质量不是很理想（细胞活性5%、结团率均>5%）的情况下，引入的背景信号会增加，分析结果不理想的直接体现包括：cell、non-cell无法有效区分和Fraction reads in cells偏低。当cell和non-cell无法有效区分时，会使得数据出现假阳性和假阴性结果！当目标细胞捕获数很大时，多细胞率会增加，数据分析时，此部分“cell”表现为基因检测数和UMI检测数是正常cell的N倍（N是一个GEM包裹的细胞数），导致所有细胞的统计数据（单个细胞基因检测中位数、单个细胞UMI检测中位数）虚高。此部分“cell”虽然可以通过设置数据分析阈值进行过滤，但是容易会有此类数据的残留和正常高基因检测细胞的人为去除！单细胞测序技术的迅速发展和应用推广，为从多维度揭示疾病发展提供了强有力的工具。

对于稀有样本，或细胞量比较少的稀有组织，样本中每一粒细胞都很珍贵，BD Rhapsody单细胞捕获平台对该种类型的样本能实现友好包容，如果在实际实验中，我们发现因为样本类型和制备单细胞悬液方法的不同，容易出现单细胞悬液中死亡细胞的比例较高的情况。也会和您探讨是否考虑去除单细胞悬液中的死细胞和其他污染物的操作，以获得高质量数据是至关重要的。这是因为，死亡的细胞易裂解导致其中的RNA释放出来。这种cell-free RNA会导致检测的背景噪声，并会影响单细胞数据的质量。因此当样本活性较差时，对细胞悬液中细胞活性检测后，需要进行一般死细胞去除的工作（一般悬液活性小于70%时考虑此操作），以保证较高的上机捕获细胞的质量。附加流式分选细胞表面Marker，对于较低分辨率的标志物也能有效鉴定，助力高要求测序项目。广州single cell RNA单细胞测序服务

单细胞测序技术提供了单个细胞水平下的科学研究视角。广州single cell RNA单细胞测序服务

您的珍贵样本，还可以放心依赖烈冰生物BD Rhapsody单细胞捕获系统，BD RhapsodyTM单细胞捕获系统采用微孔技术，对细胞的捕获没有偏好性，实现高达80%的微孔板捕获率，由于单个微孔板中容纳了22万+个微孔，而现阶段单细胞测序实验技术通常要求单个样本捕获3000-5000，至高达10000个细胞，即可满足科研探索需求，因此这种“泊松分布”的原理类似于上样细胞的无限稀释过程，但22万+微孔的存在，也对大体量细胞数目的科学研究有很好的包容性，细胞通量分为可扩展至100-40000个细胞的捕获（单个微孔板），满足您的多重需求。广州single cell RNA单细胞测序服务

上海烈冰生物医药科技有限公司是一家服务型类企业，积极探索行业发展，努力实现产品创新。是一家有限责任公司（自然）企业，随着市场的发展和生产的需求，与多家企业合作研究，在原有产品的基础上经过不断改进，追求新型，在强化内部管理，完善结构调整的同时，良好的质量、合理的价格、完善的服务，在业界受到宽泛好评。公司拥有专业的技术团队，具有单细胞测序，生物大数据云分析平台，空间转录组测序，单细胞多组学测序等多项业务。烈冰生物顺应时代发展和市场需求，通过**技术，力图保证高规格高质量的单细胞测序，生物大数据云分析平台，空间转录组测序，单细胞多组学测序。